Terminou de usar o arquivo? Feche-o usando a função fclose()

#include <stdio.h>
#include <stdlib.h>

int main(int argc, char *argv[])
{
  FILE *arquivo = fopen("c:\\testes.txt", "r");

  // testa se o arquivo foi aberto com sucesso
  if(arquivo != NULL){
    printf("Arquivo foi aberto com sucesso.\n");
    printf("Vou fecha-lo agora.");
    fclose(arquivo); // libera o ponteiro para o arquivo
  }
  else
    printf("Nao foi possivel abrir o arquivo.");

  printf("\n\n");
  system("PAUSE");
  return 0;
}